胞浆蛋白提取方法

时间：2021-11-05 19:38:18 资料我要投稿

胞浆蛋白提取方法

胞浆蛋白提取试剂盒

产品组成：

产品组成规格胞浆蛋白提取液蛋白酶抑制剂混合物

BB-3113-1

50T 10ml 100ul

BB-3113-2 100T 20ml 200ul

储存条件：

-20℃保存。

有效期：

一年。

产品简介：

本试剂盒提供配套试剂，适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的`胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

使用方法：

A．细胞蛋白提取

1. 取5-10×106个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，

尽可能吸干，收集细胞。

2. 用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3. 每20ul细胞压积中加入200μl冷的胞浆蛋白提取液，2ul蛋白酶抑制剂混合物，

高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。

4. 再次高速涡旋振荡5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。

5. 快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80

℃冰箱保存备用。 B．组织蛋白提取

1. 取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体（或

用液氮研磨），冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。 2. 在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。

3. 按照细胞蛋白的提取方法的第3步骤往下操作即可。上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。