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家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文

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家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文

家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文

冯扶民 2018-7-5 论文范文
  [家兔角膜内皮细胞的表达研究硕士论文]

  所有动物的饲养及处死均按照nih的《实验动物管理及使用指南》进行,

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[智库|专题]。

  卡波姆(carbomer一940,美国古立德化学公司);质量分数0.15%地塞米松(江苏制药厂);sabc法免疫组织化学试剂盒、aqp一1多克隆抗体(武汉博士德公司);trizol一步法组织总rna提取试剂盒、一步法逆转录聚合酶链反应(one-stepreverse transcription polymerase chain reaction.rt-pc r)试剂盒(美国invitrogen公司),

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  3o只家兔按完全随机原则分为5组,分别为对照组,2、3、4、5周组,每组6只。家兔经25 g/l异戊巴比妥钠60 mg/kg耳缘静脉注射进行全身麻醉,质量分数0.4% 盐酸奥布卡因滴眼液点眼2次进行表面麻醉,实验组用1 ml消毒空针自家兔左眼角膜缘内1 mm刺入前房,抽出房水0.2 ml,注入0.2 ml复方卡波姆溶液(含质量分数0.3% 卡波姆和0.025%地塞米松)制作高眼压模型。对照组左眼同法注入平衡盐液0.2 ml.术毕,双眼点用氯霉素滴眼液。造模后每日测量眼压1次,裂隙灯下观察眼结膜、角膜及虹膜等的反应。将h艮压升高至>22 mmhg(1 mmhg=0.133 kpa),并能持续1周以上者为高眼压模型制作成功。建模后2周,处死对照组和2周组动物,3、4、5周时分别处死相应组动物,摘除左眼眼球。各组取3只眼球储存于一70℃ 冰箱中用于rt-pcr检测;另外3只眼用质量分数4% 多聚甲醛溶液固定,石蜡包埋,用于免疫组织化学检测。

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