嗜水气单胞菌温敏胞外蛋白酶基因eprJ的克隆与检测
根据已发表的人源嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)温敏胞外蛋白酶基因eprA1的核甘酸序列,设计合成一对引物,以嗜水气单胞菌鱼源株Ah J-1基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到1 005 bp的胞外蛋白酶基因eprJ1,将该基因片段连接到pMD18-T载体中,构建克隆载体pMD-eprJ1.序列分析发现,其与发表的Ah AH1的胞外蛋白酶eprA1基因的同源性有91%.根据测序结果在保守区重新设计一对引物以增强特异性,扩增片段大小为387 bp.对1990～2004年15年间从浙江、福建、湖北及江苏等地不同患病水产动物肝肾等脏器分离到的23株Ah检测结果显示,从中国东南地区分离的21株Ah水生动物致病性菌株扩增均为阳性,2株Ah非致病性菌株为阴性,推测该基因普遍存在于致病性Ah中.检测模板DNA的灵敏度可达1.5×10-3 ng/μL.
作 者： 任燕 陆承平 姚火春 REN Yan LU Cheng-ping YAO Huo-chun 作者单位： 任燕,REN Yan(中国水产科学研究院珠江水产研究所鱼病中心,广州,510380)陆承平,姚火春,LU Cheng-ping,YAO Huo-chun(南京农业大学,农业部动物疫病诊断与免疫重点实验室,江苏,南京,210095)
刊 名： 中国水产科学 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 年，卷(期)： 2006 13(6) 分类号： S94 关键词： 嗜水气单胞菌 温敏胞外蛋白酶基因 克隆与检测