人源性中性内肽酶稳定转染细胞株的建立
目的:获得中性内肽酶(NEP)及失活中性内肽酶(inNEP)稳定表达的细胞株.方法:用酶切及基因测序鉴定质粒pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V);以脂质体LipofectamineTM2000介导pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)转染神经母细胞瘤细胞SK-N-SH,分别获得两者的稳定表达细胞株;用RT-PCR及Western blot分析NEP的表达.结果:转染4周后,可见G418单克隆抗性细胞株形成,转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞NEP表达均增高.结论:获得稳定转染pcDNA3.1-hNEP及pcDNA3.1-inNEP(E585V)的细胞株.
作 者： 孔峰 胡晓燕 杨玲玲 丁岩 王丽娜 崔行 KONG Feng HU Xiao-yan YANG Ling-ling DING Yan WANG Li-na CUI Xing 作者单位： 山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所,山东,济南,250012 刊 名： 山东大学学报（医学版） ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES) 年，卷(期)： 2006 44(2) 分类号： Q785 关键词： 中性内肽酶 阿尔茨海默病 基因治疗 转染 细胞转化,肿瘤