DNA末端定量及其应用的研究
为定量DNA断裂末端评价DNA的降解程度,以饱和标记(TdT)法定量DNA末端最大标记量(Lmax);并用流式细胞分析(FCA)、原位DNA末端标记(TUNEL)和琼脂糖电泳检测或标记DNA降解片段.结果发现: a.TdT法最低检测限5 ng DNA,线性范围为5～5 000 ng,较检测DNA降解片段的琼脂糖电泳敏感200倍以上;b.地塞米松(DEX)诱导淋巴瘤(Raji)细胞凋亡产生的Lmax呈DEX剂量与诱导时间依赖性增加;c.自发性高血压大鼠(SHR)心肌的?Lmax呈年龄依赖性增加并与正常对照鼠(WKY)相比差异非常显著(P?＜0 01);d T dT法定量?Lmax?与FCA、TUNEL或电泳分析的相关性良好(r＞0 98).TdT法定量?Lmax敏感、特异、准确,可应用于分子生物学、细胞生物学,尤其是细胞凋亡动力学DNA降解评价的定量研究.
J.J.LIU,C.J.BRADLEY,J.J.LIU,C.J.BRADLEY(Department of Pathology, University of Melbourne Austin Hospital, Heidelberg, VIC 3084, Australia)
刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2000 27(5) 分类号： Q34 Q73 关键词： DNA末端 饱和标记 终末核苷酸转移酶?