大豆类受体蛋白激酶基因(rlpk2)RNAi双元表达载体的构建及其转基因
植物类受体蛋白激酶(plant receptor-like kinases RLKs)以其特有的结构在植物的生长、发育和防御等多种生理生化过程中发挥着重要的作用.利用RNA干扰技术(RNA interference RNAi)来研究RLKs的功能已日趋成熟.本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以大豆类受体蛋白激酶基因rlpk2为靶基因,在rlpk2-cDNA序列3'端选择312bp作为构建RNAi的序列,借助中间克隆载体,经过三次亚克隆,最后形成含rlpk2-RNAi表达盒的双元表达载体pART27-R2,并转入农杆菌LBA4404.采用农杆菌介导大豆子叶节转化方法,共获得了三株转基因植株.转基因植株RT-PCR分析表明rlpk2基因已被成功敲减(knock-down),并且发现敲减大豆叶片中的rlpk2基因表达明显改善大豆叶片的光合能力,结合前期研究结果,表明rlpk2基因可能在维持叶绿体的结构及保护叶绿体膜系统的完整性方面起负调节作用.
作 者： 李小平 邓楠 马媛媛 李鹏丽 王勇 张韧 王宁宁 LI Xiao Ping DENG Nan MA Yuan Yuan LI Peng Li WANG Yong ZHANG Ren WANG Ning Ning 作者单位： 李小平,邓楠,马媛媛,李鹏丽,王勇,王宁宁,LI Xiao Ping,DENG Nan,MA Yuan Yuan,LI Peng Li,WANG Yong,WANG Ning Ning(南开大学,植物生物学及生态学系,天津,300071)张韧,ZHANG Ren(Department of Biological Sciences,University of Wollongong,NSW2522,Australia)
刊 名： 分子细胞生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF MOLECULAR CELL BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 39(1) 分类号： Q2 关键词： 大豆 类受体蛋白激酶 RNAi 双元表达载体