毕赤酵母表达HWTX-Ⅰ的不均一性分析
为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)时产生不均一性表达产物的原因,应用阳离子交换层析、反相HPLC、Tricine SDS-PAGE电泳、质谱等技术,对基因工程菌Pichia pastoris GS115/HWTX-Ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定,并对不均一产物的N端和C端进行测序,结果表明:表达产物的不均一性主要体现在重组HWTX-Ⅰ的N端信号肽加工的不完全以及C末端的内部降解.生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然HWTX-Ⅰ活性的30%.同时,对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策.
作 者： 聂东宋 周延凯 曹佐英 刘宇 NIE Dong-Song ZHOU Yan-Kai CAO Zuo-Ying LIU Yu 作者单位： 湖南理工学院化学化工系,岳阳,414000 刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(2) 分类号： Q786 关键词： 毕赤酵母 重组虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ 不均一性 基因工程