应用T/A策略克隆乙肝病毒pC/C及C基因
以克隆乙型肝炎病毒pC/C及C基因为例,报道了在DNA重组中,当目的基因与载体末端不匹配时可采取的一新方法.用内切酶切取的基因片段为平端时,可在含dATP的反应体系中,用Taq酶的末端转移酶活性在其3'末端加上单个碱基(dA)的突出尾;基因片段为3'凹端时,可在含4种dNTP的体系中,利用Taq酶的聚合酶活性先将其末端补平,再经末端转移酶活性在其3'末端加dA尾;末端经此修饰的基因片段可亚克隆至T载体中,再克隆于其他表达载体中.
作 者： 刘定燮 骆抗先 LIU Ding-Xie LUO Kan-Xian 作者单位： 第一军医大学南方医院感染内科实验室,广州,510515 刊 名： 生物化学与生物物理进展 ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS 年，卷(期)： 2000 27(6) 分类号： Q78 关键词： DNA重组 T载体 Taq DNA聚合酶 乙型肝炎病毒