通过N端替换提高木聚糖酶的热稳定性

通过N端替换提高木聚糖酶的热稳定性

以来源于Thermomonospora fusca的耐高温木聚糖酶TfxA和来源于Streptomyces olivaceoviridis的高比活木聚糖酶XYNB为亲本,构建出耐热高比活融合木聚糖酶TB,将TB在大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中进行表达并对表达产物的酶学性质进行分析比较.分析表明,融合蛋白TB最适pH值为6.0,最适温度为70℃,较XYNB有大幅度的提高;在热稳定性方面,TB明显优于XYNB,将两种稀释好的酶液分别在80℃和90℃下热处理3min,TB的热稳定性较XYNB提高了6倍左右;TB的pH稳定性为5～9(相对剩余活性在50%以上的pH范围),较XYNB有所下降,但两者的比活性基本不变,保持了亲本XYNB的高比活性.通过同源建模和序列比较,分析了可能影响融合蛋白TB酶学性质的因素,为进一步研究木聚糖酶的结构与功能提供了新的思路.

作 者： 杨浩萌 孟昆 罗会颖 王亚茹 袁铁铮 柏映国 姚斌 范云六 YANG Hao-Meng Meng Kun LUO Hui-Ying WANG Ya-Ru YUAN Tie-Zheng BAI Ying-Guo YAO Bin FAN Yun-Liu   作者单位： 杨浩萌,孟昆,罗会颖,王亚茹,袁铁铮,柏映国,姚斌,YANG Hao-Meng,Meng Kun,LUO Hui-Ying,WANG Ya-Ru,YUAN Tie-Zheng,BAI Ying-Guo,YAO Bin(中国农业科学院饲料研究所,北京,100081)

范云六,FAN Yun-Liu(中国农业科学院生物技术研究所,北京,100081) 

刊 名： 生物工程学报  ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 22(1)  分类号： Q55  关键词： 融合木聚糖酶   木聚糖酶氮端   热稳定性  

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