透明质酸合成酶2真核表达载体的构建及表达
构建了透明质酸合成酶2真核表达载体,并观察其在真核细胞中的表达.利用RT-PCR法从MG63细胞总RNA中扩增,获得人透明质酸合成酶2 cDNA,并克隆至真核表达载体pEGFP-N3,将经双酶切鉴定和DNA测序证实的阳性重组子命名为pEGFP-N3-HAS2.脂质体法转染HEK293细胞,用倒置荧光显微镜检测、分析其在HEK293细胞表达及定位.双酶切鉴定和DNA测序证实成功构建pEGFP-N3-HAS2真核表达载体.转染HEK293细胞后可见HAS2-EGFP融合蛋白高表达并定位于浆膜.该载体的成功构建为进一步探讨透明质酸合成酶2在治疗骨性关节炎、修复关节软骨缺损中的应用价值奠定了基础.
作 者： 杨泉生 朱庆生 李立文 张大伟 曹晓瑞 李文献 YANG Quan-sheng ZHU Qing-sheng LI Li-wen ZHANG Da-wei CAO Xiao-rui LI Wen-xian 作者单位： 第四军医大学西京医院全军骨科研究所,西安,710032 刊 名： 科学技术与工程 ISTIC 英文刊名： SCIENCE TECHNOLOGY AND ENGINEERING 年，卷(期)： 2007 7(8) 分类号： Q786 关键词： 透明质酸合成酶 透明质酸 EGFP