人的可溶性L-selectin(sL-selectin)在杆状病毒载体系统中的表达与纯化
目的 利用昆虫细胞杆状病毒系统表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素(human recombinant soluble L-selectin:sL-selectin),探索在真核细胞中高效表达人的重组可溶性L-型选择蛋白配体凝集素的新途径.方法 将已经重组好的杆状病毒感染昆虫细胞,表达sL-选凝素于细胞培养上清,利用末端连接的 ZZ-结构域(蛋白A来源的首尾相连的二聚化Z结构域)与IgG-琼脂糖-6的结合而分离纯化,通过 SDS-PAGE鉴定分子量的大小,并用特异性抗体验证,另外通过重组的sL-选凝素与SMMC7721的黏附观察其活性.结果 sL-选凝素可在昆虫细胞中表达,产物的分子量约为46 000,与人肝癌细胞SMMC7721的结合率可达70%.结论 sL-选凝素可通过杆状病毒载体在昆虫细胞中有效表达,分离纯化后依然保持生理活性.
作 者： 胡萍 石必枝 吴兴中 HU Ping SHI Bi-zhi WU Xing-zhong 作者单位： 复旦大学上海医学院生物化学与分子生物学系-卫生部糖复合物重点实验室,上海,200032 刊 名： 复旦学报（医学版） ISTIC PKU 英文刊名： FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES 年，卷(期)： 2006 33(5) 分类号： Q503 关键词： L-型选择蛋白配体凝集素 杆状病毒 ZZ-结构域