烟实夜蛾触角化学感受蛋白cDNA的克隆、序列分析及在大肠杆菌中的表达
利用RT-PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpa assulta触角化学感受蛋白(chemosensory protein)的全长cDNA.克隆和测序结果表明,烟实夜蛾化学感受蛋白基因核苷酸序列全长384bp(GenBank序列号:DQ285667),编码127个氨基酸残基,预测N-末端包含16个氨基酸组成的信号肽序列,因此估测其成熟蛋白分子量为12.97kD,等电点为5.32.将该基因重组到表达载体pGEX-4T2中,并转入原核细胞中进行表达.SDS-PAGE和Westem印迹分析表明,经IPTG诱导后,烟实夜蛾化学感受蛋白基因能在大肠杆菌BL21中表达,电泳检测到一条约39 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相符.
作 者: 蒋金炜 高素霞 安世恒 王琛柱 JIANG Jin-Wei GAO Su-Xia AN Shi-Heng WANG Chen-Zhu 作者单位: 蒋金炜,高素霞,安世恒,JIANG Jin-Wei,GAO Su-Xia,AN Shi-Heng(河南农业大学植物保护学院,郑州,450002)王琛柱,WANG Chen-Zhu(中国科学院动物研究所,农业虫害鼠害综合治理研究国家重点实验室,北京,100080)
刊 名: 昆虫学报 ISTIC PKU 英文刊名: ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年,卷(期): 2006 49(5) 分类号: Q966 关键词: 烟实夜蛾 化学感受蛋白 基因克隆 测序 原核表达