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人类新基因flj4的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探

时间:2021-12-09 13:04:32 生物医学论文 我要投稿

人类新基因flj20174的克隆、亚细胞定位、表达谱及功能初探

目的: 研究人类系统性RNAi相关基因flj20174的克隆表达、亚细胞定位和表达谱,以及功能的初步探索.方法:利用生物信息学方法分析、预测flj20174基因的表达谱和功能;采用RT-PCR技术,从健康人外周血单个核细胞cDNA中,扩增获得flj20174可能的全长编码区,并将其亚克隆于pEGFP-N1载体;利用Northern杂交鉴定其转录本;利用半定量PCR确定flj20174在免疫组织和免疫细胞中的表达谱;通过脂质体转染入HeLa细胞,观察融合蛋白的亚细胞定位和过表达对细胞状态的影响.结果与结论:获得了2 484 bp的全长编码区,测序后发现与NCBI公布的Ak00018的序列完全一致;Northern杂交证实其转录本约为4 669 bp;证实该基因属于低丰度基因,在免疫细胞中有相对较高的表达,并在B细胞和T细胞激活后表达量下降;与EGFP融合表达后可见该蛋白主要分布于内膜系统,而且过表达该融合蛋白可以引起细胞的死亡,推测此过程可能与机体的免疫防御相关.

作 者: 刘朝晖 曹国军 陈留存 杨光 李少华 高亚萍 丁红梅 范明 沈倍奋 邵宁生 LIU Zhao-Hui CAO Guo-Jun CHEN Liu-Cun YANG Guang LI Shao-Hua GAO Ya-Ping DING Hong-Mei FAN Ming SHEN Bei-Fen SHAO Ning-Sheng   作者单位: 军事医学科学院基础医学研究所,北京,100850  刊 名: 军事医学科学院院刊  ISTIC PKU 英文刊名: BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES  年,卷(期): 2006 30(5)  分类号: Q786  关键词: flj20174   基因表达   亚细胞定位   细胞凋亡