牡丹ISSR-PCR反应体系正交优化设计
以"凤丹"(Paeonia ostii)基因组DNA为模板,采用正交试验设计方法,研究牡丹ISSR反应体系的影响因素,建立了适合牡丹的ISSR反应体系及程序.10μl反应体系为:1×反应缓冲液,2.5 mmol/L M2+,0.4 mmol/L dNTPs,1.0 U Taq聚合酶,0.75μmol/L引物,10～20 ng模板DNA.反应程序为:94℃预变性3 min;94℃变性45 s,45～60℃(不同引物退火温度各异)复性45 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸7 min;4℃保存.通过梯度退火试验,确定不同引物的退火温度.
胡永红(上海植物园,上海,200231)
刊 名： 安徽农业科学 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)： 2006 34(24) 分类号： Q946-33 关键词： 牡丹 ISSR-PCR 正交设计 反应体系