小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞过程中基因表达情况和电生理特性研究
目的:探讨小鼠胚胎干细胞在体外分化心肌样细胞过程中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况以及分化的心肌样细胞的电生理特点.方法:将转染PαMHC-EGFP小鼠D3胚胎干细胞系,体外诱导分化心肌样细胞,应用RT-PCR检测0 d、3 d、5 d、7 d、10 d、14 d拟胚体(EB)细胞中αMHC、Anf、MLC2v基因的表达情况,同时应用膜片钳技术,观察心肌样细胞的电生理特性.结果:在EB形成的7d和8d可见EB内出现有绿色荧光蛋白表达的心肌样细胞群;RT-PCR结果显示αMHC基因表达在EB体形成第7 d,而在10 d、14 d跳动的心肌样细胞中该基因表达增强(P＜0.05),而Anf、MLC2v基因的表达仅出现在心肌样细胞;膜片钳记录的心肌样细胞动作电位显示,73.5%(n=34)的细胞记录到典型心房肌细胞动作电位[APD90=(78.4±3.1)ms];20.5%细胞表现为起搏细胞动作电位[APD90=(112.6±5.5)ms];1个细胞显示了典型的心室肌细胞动作电位的特征(APD90=200 ms).结论:在心肌样细胞分化的早期可见αMHC、Anf、MLC2v基因的表达,这3种基因可为心肌发育过程中的特征性基因并对心肌发育起调节作用.而此干细胞系分化的心肌样细胞主要为心房肌细胞和起搏细胞.
段亚琦,唐明,DUAN Ya-qi,TANG Ming(华中科技大学同济医学院生理系,湖北,武汉,430030)
张义侠,ZHANG Yi-xia(中国医科大学,第一临床医院消化内科,辽宁,沈阳,110001)
J.Hesheler,J.Hesheler(Institute of Neurophysiology,University of Cologne,D-50931 Cologne,Germany)
刊 名： 中国病理生理杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF PATHOPHYSIOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(4) 分类号： Q254 R542.2 关键词： 胚胎干细胞 心肌细胞 细胞分化 基因表达