抗苯巴比妥单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其免疫学特性鉴定
苯巴比妥(PB)经化学修饰在其苯环上引入活性基团氨基,合成半抗原对氨基苯巴比妥(pAPB),用重氮化法将pAPB偶联于BSA,合成人工抗原BSA-pAPB,并用红外(IR)、紫外(UV)、SDS-PAGE鉴定;用BSA-pAPB免疫Balb/C小鼠,细胞融合技术建立抗PB的单克隆抗体mAb(PB mAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备PB mAb,并鉴定其免疫学特性.结果表明,BSA-pAPB偶联成功,偶联率为1:19;筛选出1B9、3C4、3F6、4E6共4株杂交瘤细胞,其中最好的4E6株间接ELISA效价细胞培养上清为1:8.1×102,腹水为1:6.4×105,同种型为IgG1/κ,亲和常数(Ka)为2.08×1010L/mol,对PB的半数抑制浓度(IC50)为11.35μg/L,与巴比妥的交叉反应率(CR%)为12.4%,与其他化合物无CR.本试验研制出高效价、敏感、特异的PB mAb,可用于PB残留检测的免疫学实验.
作 者： 王自良 张改平 杨艳艳 张海棠 王选年 邓瑞广 WANG Zi-liang ZHANG Gai-ping YANG Yan-yan ZHANG Hai-tang WANG Xuan-nian DENG Rui-guang 作者单位： 王自良,张海棠,王选年,WANG Zi-liang,ZHANG Hai-tang,WANG Xuan-nian(河南科技学院动物科学学院,河南,新乡,453003)张改平,杨艳艳,邓瑞广,ZHANG Gai-ping,YANG Yan-yan,DENG Rui-guang(河南省动物免疫学重点实验室,河南,郑州,450002)
刊 名： 核农学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NUCLEAR AGRICULTURAL SCIENCES 年，卷(期)： 2006 20(4) 分类号： Q94 关键词： 苯巴比妥 半抗原 人工抗原 单克隆抗体 免疫学特性