人三叶因子1大肠杆菌及毕赤酵母表达载体的构建与鉴定
目的:构建人三叶因子1(hTFF1)的大肠杆菌及毕赤酵母表达载体.方法:从人胃窦部提取总RNA,经RT-PCR得到hTFF1 cDNA,用PCR方法扩增hTFF1基因,并将其分别克隆到大肠杆菌的表达载体pET32α及毕赤酵母的表达载体pGAPZαA中,构建原核及真核重组表达质粒pET32α-hTFF1和pGAPZαA-hTFF1.结果:通过双酶切和基因序列分析确定插入pET32α和pGAPZαA中的片段为hTFF1基因片段.结论:重组质粒pET32α-hTFF1和pGAPZαA-hTFF1成功构建,为在比较原核和真核细胞中hTFF1高效表达的情况及下一步的功能研究奠定了基础.
作 者: 吴炜 孙勇 吕尚军 张勇 彭曦 WU Wei SUN Yong LV Shang-jun ZHANG Yong PENG Xi 作者单位: 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400038 刊 名: 现代生物医学进展 ISTIC 英文刊名: PROGRESS IN MODERN BIOMEDICINE 年,卷(期): 2007 7(8) 分类号: Q78 关键词: 三叶因子1 基因重组 毕赤酵母 表达载体 质粒构建