梅毒螺旋体膜抗原基因在毕赤酵母中的表达和蛋白纯化
以梅毒螺旋体(Treponema pallidum subsp.pallidum)Nichols菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增梅毒螺旋体47kDa、17kDa和15kDa 3个膜抗原基因,克隆进毕赤酵母表达载体pPICZ B,构建重组表达载体pTP47、pTP17、pTP15,转化酵母菌株GS115,甲醇诱导表达.表达菌体裂解后通过镍离子亲和层析获得3个抗原与6xHis tag的融合蛋白,重组蛋白的获得量分别为His-TP15:4.8mg/L;His-TP 17:6.6mg/L;His-TP47:25mg/L,经SDS-PAGE鉴定纯度都在96%以上,ELISA鉴定均具有很好的抗原性.从而首次在毕赤酵母中表达出梅毒螺旋体膜抗原,为梅毒血清学检测方法开辟了新的抗原制备途径.
作 者： 黄宗炎 王亚妮 朱娟莉 董兆麟 陈超 HUANG Zong-yan WANG Ya-ni ZHU Juan-li DONG Zhao-lin CHEN Chao 作者单位： 黄宗炎,王亚妮,董兆麟,HUANG Zong-yan,WANG Ya-ni,DONG Zhao-lin(西北大学生命科学学院,国家微检测系统工程技术研究中心,西安,710069)朱娟莉,陈超,ZHU Juan-li,CHEN Chao(陕西西大北美基因股份公司,西安,710069)
刊 名： 微生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA MICROBIOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 46(5) 分类号： Q93 关键词： 梅毒螺旋体 毕赤酵母 膜抗原 表达