大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达
通过PCR克隆了大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因manA,分别构建了含manA基因的原核和真核生物表达载体.在大肠杆菌中经IPTG诱导表达的GST-PMI融合蛋白,经亲和层析纯化和PreScission蛋白酶酶切,SDS-PAGE分析证实PMI蛋白为42 ku.对转manA基因的拟南芥进行PCR分析表明,manA基因已稳定整合到拟南芥基因组中.氯酚红显色反应证实,整合到拟南芥基因组中的manA基因能表达具有6-磷酸甘露糖异构酶活性的PMI蛋白.这些结果说明,克隆的manA基因可在细菌和高等植物中高效表达.
作 者: 张倩 廖玉才 陈方方 董璇 李和平 ZHANG Qian LIAO Yu-cai CHEN Fang-fang DONG Xuan LI He-ping 作者单位: 张倩,李和平,ZHANG Qian,LI He-ping(华中农业大学生命科学技术学院,武汉,430070)廖玉才,陈方方,董璇,LIAO Yu-cai,CHEN Fang-fang,DONG Xuan(华中农业大学植物科学技术学院,武汉,430070)
刊 名: 华中农业大学学报 ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF HUAZHONG AGRICULTURAL UNIVERSITY 年,卷(期): 2006 25(5) 分类号: Q785 关键词: manA基因 6-磷酸甘露糖异构酶活性 细菌诱导表达 拟南芥转化