泽泻ISSR反应体系的建立与优化
以四川泽泻为实验试材,采用改进的CTAB法提取了泽泻的高质量总DNA模板,克服了泽泻中所富含的酚类物质的影响.对泽泻ISSR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选,建立了标记位点清晰、稳定、重复性好、可用于泽泻ISSR-PCR分析的最适反应体系,它们是:25 μL PCR反应体系中,10×Taq酶配套缓冲液,1U Taq DNA聚合酶,1.8~2.0 mmol/L MgCl2,100 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L引物, DNA模板约10~20 ng,退火温度在52~60℃;为进一步研究泽泻居群的ISSR分子标记鉴别奠定了基础.
作 者: 贺佳 丁小余 褚必海 刘冬扬 丁鸽 He Jia Ding Xiaoyu Chu Bihai Liu Dongyang Ding Ge 作者单位: 南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097 刊 名: 南京师大学报(自然科学版) ISTIC PKU 英文刊名: JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2006 29(3) 分类号: Q946 关键词: 泽泻 ISSR反应体系 建立与优化