泽泻ISSR反应体系的建立与优化

泽泻ISSR反应体系的建立与优化

以四川泽泻为实验试材,采用改进的CTAB法提取了泽泻的高质量总DNA模板,克服了泽泻中所富含的酚类物质的影响.对泽泻ISSR反应体系中各个主要影响因子进行了优化和筛选,建立了标记位点清晰、稳定、重复性好、可用于泽泻ISSR-PCR分析的最适反应体系,它们是:25 μL PCR反应体系中,10×Taq酶配套缓冲液,1U Taq DNA聚合酶,1.8～2.0 mmol/L MgCl2,100 μmol/L dNTP,0.3 μmol/L引物, DNA模板约10～20 ng,退火温度在52～60℃;为进一步研究泽泻居群的ISSR分子标记鉴别奠定了基础.

作 者： 贺佳 丁小余 褚必海 刘冬扬 丁鸽 He Jia Ding Xiaoyu Chu Bihai Liu Dongyang Ding Ge   作者单位： 南京师范大学生命科学学院,江苏,南京,210097  刊 名： 南京师大学报（自然科学版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NANJING NORMAL UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2006 29(3)  分类号： Q946  关键词： 泽泻   ISSR反应体系   建立与优化  

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