亚细胞蛋白质组学技术分析MG132诱导HL-60细胞G2/M期阻滞的分子机制
背景与目的:蛋白酶体抑制剂能够诱导多种肿瘤细胞凋亡,是一种有应用前景的抗肿瘤制剂.本研究通过对蛋白酶体抑制剂--MG132诱导G2/M期阻滞的HL-60细胞核蛋白进行蛋白质组学分析,探索参与HL-60细胞G2/M期阻滞调控的相关蛋白.方法:流式细胞术分析MG132处理的HL-60细胞周期,选取合适的时间点,提取细胞核,光镜和Western blot检测细胞核纯度,裂解制样,通过二维电泳和MALDI-TOF-TOF串联质谱分析,鉴定表达显著差异的细胞核蛋白.结果:HL-60细胞在被2.5 μmol/L MG132诱导凋亡之前8 h,有明显的G2/M期阻滞发生;提取阻滞发生时和阻滞发生前的HL-60细胞核蛋白,二维电泳分析获得23个差异表达的蛋白点,质谱鉴定了8个核蛋白.结论:质谱鉴定的eIF5A、mRNA前体剪接因子等蛋白可能参与HL-60细胞的G2/M周期阻滞调控,为研究蛋白酶体抑制剂诱导白血病细胞周期阻滞及凋亡的分子机制提供了一些线索.
作 者： 钱俊杰 应万涛 孙国敬 宋宜 刘斌 董燕 钱小红 孙志贤 QIAN Jun-Jie YING Wan-Tao SUN Guo-Jing SONG Yi LIU Bin DONG Yan QIAN Xiao-Hong SUN Zhi-Xian 作者单位： 军事医学科学院放射医学研究所生物化学与分子生物学实验室,北京,100850 刊 名： 癌症 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CANCER 年，卷(期)： 2006 25(5) 分类号： Q55 关键词： 蛋白酶体抑制剂 HL-60细胞 细胞周期 细胞核蛋白 蛋白质组