金黄色葡萄球菌SPA基因的克隆、表达及纯化
目的: 构建携带Staphylococcal protein A (SPA)基因的原核表达载体, 诱导表达具有活性的SPA.方法: 用PCR从金黄色葡萄球菌基因组中扩增SPA基因并克隆入pET32a(+)载体中, 在大肠杆菌BL21〈DE3〉中表达.表达产物经亲和层析进行纯化.结果: 所构建的原核表达载体为高效表达载体, 工程菌表达的SPA约占菌体总蛋白的40%, 经亲和层析纯化后获得SPA, 纯度达到99%.结论: 成功地建立了制备及纯化SPA的方法, 为SPA大量生产以及构建SPA融合表达体系奠定了基础.
