表达鸡新城疫病毒F、HN基因和传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒的构建及其特性研究
利用同源重组将新城疫病毒(NDV)的F和HN基因、传染性喉气管炎病毒(ILTV)的gB基因以及报告基因LacZ插入鸡痘病毒(FPV)的017株的复制非必需区,其中NDV的F、HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ是在早晚期启动子LP2EP2的控制下,大肠杆菌报告基因LacZ在晚期启动子P11的控制下.经过10轮蓝斑纯化获得了包含了NDV的F和HN基因、ILTV的gB基因以及报告基因LacZ的重组鸡痘病毒,称为rFPV-F/HN/gB/LacZ.经PCR方法证明rFPV-F/HN/gB/LacZ基因组中含有NDV的F基因、HN基因和ILTVgB基因;间接免疫荧光试验和 Western-blot试验表明NDV的F、HN蛋白和ILTV gB蛋白在rFPV-F/HN/gB/LacZ 感染的CEF细胞中获得表达.与亲本毒相比,重组病毒在病毒的复制和致鸡胚成纤维细胞的病变方面无显著不同.这证明了在鸡痘病毒载体的一个复制非必需区可以同时插入多个禽类病原的多个外源基因,为制备多价基因工程疫苗奠定了基础.
王云峰,智海东,徐灵龙,王玫,WANG Yun-Feng,ZHI Hai-Dong,XU Ling-Long,WANG Mei(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)
苗得园,张培君,MIAO De-Yuan,ZHANG Pei-Jun(北京市农业科学院畜牧兽医研究所,北京,100094)
童光志,TONG Guang-Zhi(中国农业大学动物医学院,北京,100094;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001)
汪明,WANG Ming(中国农业大学动物医学院,北京,100094)
刊 名： 生物工程学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(6) 分类号： Q78 关键词： 重组鸡痘病毒 新城疫病毒 传染性喉气管炎病毒 F基因 HN基因 gB基因