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狂犬病病毒糖蛋白真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

时间:2021-12-07 17:12:33 生物医学论文 我要投稿

狂犬病病毒糖蛋白真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的 构建狂犬病病毒糖蛋白基因的真核细胞表达载体,并在COS-7细胞中表达.方法 培养狂犬病病毒, 提取负链RNA,采用RT-PCR的方法扩增糖蛋白基因,并将该基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1(A)上,通过脂质体介导的方法,转染COS-7细胞,用ELISA及间接免疫荧光法检测狂犬病病毒糖蛋白在COS-7细胞中的瞬时表达.结果 成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(A)/G,转染COS-7细胞后,在其培养上清中未检测到狂犬病病毒糖蛋白的表达.间接免疫荧光试验表明,pcDNA3.1(A)/G能有效地表达狂犬病病毒糖蛋白于转染的COS-7细胞膜上.结论 真核细胞表达载体pcDNA3.1(A)/G能够在COS-7细胞中表达狂犬病病毒糖蛋白,为开发狂犬病病毒糖蛋白基因工程疫苗奠定了基础.

作 者: 姚为民 舒适 周华 隋红 刘原舒 王志武   作者单位: 姚为民,舒适,周华,隋红,刘原舒(长春生物制品研究所,长春,130062)

王志武(中国生物技术集团公司,北京,100029) 

刊 名: 中国生物制品学杂志  ISTIC 英文刊名: CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS  年,卷(期): 2007 20(9)  分类号: Q786  关键词: 狂犬病病毒   糖蛋白   COS-7细胞   真核表达