枯草杆菌脂肪酶基因在大肠杆菌中的诱导分泌表达
借助生物信息学对已克隆的枯草杆菌脂肪酶LipB2全长基因序列进行比对分析.结果显示该脂肪酶基因全长635 bp,编码包括31个氨基酸分泌型信号肽在内的211个氨基酸,与NCBI GenBank中已报道的枯草杆菌属脂肪酶核苷酸序列有94.0%的一致性.将该基因克隆到pET-28a(+)表达载体上,转化大肠杆菌BL21(DE3),利用枯草杆菌脂肪酶的信号肽序列进行了分泌表达.SDS-PAGE电泳显示分泌表达的脂肪酶分子质量约为21 kD.对表达条件优化后,在30℃、大肠杆菌菌液OD_(600)值为1 8、乳糖诱导浓度为1 5 mM、摇瓶发酵10 h后大肠杆菌分泌表达26 0 U/mL重组脂肪酶,相比较IPTG的诱导,既实现了脂肪酶的高效表达,又节省了成本.
作 者： 李海军 王林刚 王治泽 陈芳 高剑峰 Li Haijun Wang Lingang Wang Zhize Chen Fang Gao Jianfeng 作者单位： 石河子大学生命科学学院,石河子,832003 刊 名： 生物技术通报 PKU 英文刊名： BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年，卷(期)： 2010 ""(3) 分类号： Q93 关键词： 乳糖诱导 IPTG诱导 枯草杆菌 脂肪酶基因 分泌表达 Induction of lactose Induction of IPTG Bacillus subtili Lipase gene Secretory expression