黄藤ISSR反应体系的条件优化
在利用ISSR技术对黄藤进行分子生物学研究过程中,对影响PCR 扩增效果的一些因素,如模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度以及退火温度等指标进行筛选和优化,获得用于黄藤ISSR-PCR 分析最适宜的PCR反应条件:20 μLPCR反应体积中含有1×缓冲液,20 ng 模板DNA,2 mmol·L-1 MgCl2,100 μmol·L-1 dNTP,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.4 μmol·L-1引物,2%甲酰胺,0.5 mmol·L-1亚精胺.扩增程序为:94 ℃预变性5 min;再35个循环:94 ℃ 30 s,52 ℃ 45 s和72 ℃ 1.5 min;最后72 ℃延伸7 min.
作 者： 杨华 宋绪忠 尹光天 白嘉雨 甘四明 YANG Hua SONG Xu-zhong YIN Guang-tian BAI Jia-yu GAN Si-ming 作者单位： 杨华,宋绪忠,YANG Hua,SONG Xu-zhong(浙江省林业科学研究院,浙江,杭州,310023)尹光天,白嘉雨,甘四明,YIN Guang-tian,BAI Jia-yu,GAN Si-ming(中国林业科学研究院热带林业研究所,广东,广州,510520)
刊 名： 福建林学院学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FUJIAN COLLEGE OF FORESTRY 年，卷(期)： 2006 26(2) 分类号： Q946.33 关键词： 黄藤 ISSR 优化