方正银鲫微卫星序列的筛选及PCR扩增产物的初步检测
采用小片段克隆法构建了方正银鲫[(Carassius auratus gibelio (Block)]部分基因组文库,并采用非影印的方法将转化子转移到硝酸纤维素滤膜上.用人工合成、并经放射性同位素[γ-32P]ATP标记的(CA)15探针对构建的基因组文库进行筛选,获得137个阳性克隆,经测序得到微卫星序列130个,其中完美型、非完美型、混合型分别占64.3%、16.9%和18.8%.应用引物设计软件Primer Primer5.0进行引物设计,得到引物103对.合成30对引物,随机选取其中5对进行PCR扩增.结果表明,这5对引物均可以稳定扩增,并且观测杂合度均较高.
作 者： 贾智英 梁利群 孙效文 JIA Zhi-ying LIANG Li-qun SUN Xiao-wen 作者单位： 贾智英,JIA Zhi-ying(中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类生物工程育种重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150070;上海水产大学,生命科学与技术学院,上海,200090)梁利群,孙效文,LIANG Li-qun,SUN Xiao-wen(中国水产科学研究院,黑龙江水产研究所,农业部北方鱼类生物工程育种重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150070)
刊 名： 中国水产科学 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FISHERY SCIENCES OF CHINA 年，卷(期)： 2006 13(6) 分类号： Q959.46 关键词： 雌核发育 银鲫 微卫星DNA