pcDNA3.1(+)/hFasL真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达
目的:构建pcDNA3.1(+)/hFasL真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬时表达.方法:经XbaⅠ酶切pBluescriptⅡ KS(+)/hFasL得到hFasL cDNA全长序列,将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+).重组质粒pcDNA3.1(+)/hFasL经过酶切和测序鉴定;阳离子脂质体法转染COS-7细胞并经免疫细胞化学染色检测重组体的表达.结果:重构质粒经限制性核酸内切酶XbaⅠ、DraⅡ、HindⅢ酶切以及序列分析鉴定,表明真核表达载体构建正确;以脂质体法转染COS-7细胞后,免疫细胞化学染色检测表明转染细胞能够表达FasL.结论:成功构建了pcDNA3.1(+)/hFasL真核表达载体并能在真核细胞中进行表达.
作 者： 李秀娟 刘纯 张徽 随华 作者单位： 李秀娟,刘纯,随华(重庆医科大学附属第一医院内分泌科)张徽(重庆医科大学病理学教研室,重庆,400016)
刊 名： 重庆医科大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF CHONGQING MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 31(6) 分类号： Q786 关键词： FasL 真核表达 COS-7细胞 质粒