优化感受态细胞制备方法提高转化效率的研究
通过研究不同生长状态、处理溶液、保存时间及热激时间对感受态细胞制备的影响,分析了影响大肠杆菌株JM109和DH5α感受态细胞形成因素,优化了制备感受态细胞的方法.结果表明,OD600为0.43的大肠杆菌菌液经处理液(20 mmol/L MgCl2 + 80 mmol/L CaCl2)处理,-85℃放置12~14 h,42℃热激处理90 s,转化效率最高,可达5.5×105~6×105 cfu/μg DNA(pSilencer2.1-U6-neo),随着质粒放置时间增加,转化效率下降.
作 者: 王世伟 李旭业 张伟伟 WANG Shi-wei LI Xuye ZHANG Wei-wei 作者单位: 王世伟,张伟伟,WANG Shi-wei,ZHANG Wei-wei(齐齐哈尔大学,生命科学与工程学院,黑龙江,齐齐哈尔161006)李旭业,LI Xuye(黑龙江省畜牧研究所,黑龙江,齐齐哈尔161005)
刊 名: 齐齐哈尔大学学报(自然科学版) 英文刊名: JOURNAL OF QIQIHAR UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2009 25(2) 分类号: Q933 关键词: 感受态细胞 制备方法 转化效率