含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

在本研究中,用限制性内切酶Nco Ⅰ和Bgl Ⅱ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein 上切下zeolin基因(约1 600bp)和γ-zein基因(约720 bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein.采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatus L.).经过共培养、筛选分化、再生,得到抗件植株.对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达.含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P＜0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著.

作 者： 关宁 王涌鑫 李聪 苗丽宏 张博 Guan Ning Wang Yongxin Li Cong Miao Lihong Zhang Bo   作者单位： 关宁,王涌鑫,李聪,苗丽宏,Guan Ning,Wang Yongxin,Li Cong,Miao Lihong(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所牧草遗传育种研究室,北京,100193)

张博,Zhang Bo(新疆农业大学草地资源与生态自治区重点实验室,乌鲁木齐,830052) 

刊 名： 分子植物育种  英文刊名： MOLECULAR PLANT BREEDING  年，卷(期)： 2009 7(2)  分类号： Q94  关键词： 含硫氨基酸基因   表达载体构建   百脉根   转化  

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