耐辐射球菌基因组DNA酶切条件的优化
目的 研究耐辐射奇球菌Deinococcus radiodurans R1基因组DNA酶切的优化条件,从而获得构建基因文库所需的DNA片段,旨在构建DR菌基因组DNA表达文库,进一步筛选文库中与其有相互作用的蛋白. 方法 培养耐辐射奇球菌,提取基因组DNA,用Sau3AI酶切DR菌基因组DNA,分别从酶浓度、酶切时间等选择酶切产生的DNA片段集中在0.5～5.0 kb的最佳条件,最后通过琼脂糖凝胶电泳进行检测. 结果 Sau3AI 酶切DR菌基因组DNA的最佳酶浓度为0.125 u/10 μL,最佳作用时间为3 h,此条件下DR菌基因组DNA片段主要集中于0.5～5.0 kb. 结论 优化了DR菌基因组DNA的酶切条件,为进一步构建DR菌基因组DNA表达文库,筛选与高抗辐射相关基因产物的互作蛋白奠定了基础.
作 者： 马云 徐向红 李斌元 何淑雅 作者单位： 南华大学,生物化学与分子生物学教研室,湖南,衡阳,421001 刊 名： 南华大学学报（医学版） 英文刊名： JOURNAL OF NANHUA UNIVERSITY(MEDICAL EDITION) 年，卷(期)： 2009 37(2) 分类号： Q783 关键词： 耐辐射奇球菌 酶切条件 优化