水稻磷酸酯酶2A基因蛋白的原核表达载体构建、表达和纯化
利用PCR技术,从水稻品种日本晴幼穗cDNA中扩增磷酸酯酶2A的基因ORF片段,并将其克隆入原核表达载体pGEX-6p-1中构建重组质粒pGEX-6p-1-PP-2A,经限制性内切酶酶切鉴定以及测序结果表明成功构建了原核表达载体pGEX-6p-1-PP2A,转化E.coli JM109并通过终浓度为0.4mmol/L的IPTG诱导,表达出39kD的GST-PP2A融合蛋白,并用蛋白亲和层析柱GSTrap FF对表达产物进行纯化,为下一步的研究打下了实验基础.
作 者： 吴华 严定平 罗越华 WU Hua YAN Ding-ping LUO Yue-hua 作者单位： 海南大学农学院,海口,570228 刊 名： 贵州科学 英文刊名： GUIZHOU SCIENCE 年，卷(期)： 2009 27(2) 分类号： Q786 S511 关键词： 磷酸酯酶2A 载体构建 重组蛋白 原核表达