南阳牛血液基因组DNA提取与ANGPTL4基因的PCR扩增
采集20例南阳牛的血液,采用酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA, 并且对ANGPTL4基因部分序列(677~998 bp)PCR扩增条件进行了优化.结果表明,获得的牛基因组DNA经0.8%琼脂糖凝胶电泳检测,主条带清晰,表明获得的南阳牛基因组DNA可以用于后续实验;以所提取的基因组DNA为模板,优化ANGPTL4基因片段扩增的条件,结果表明,最理想的PCR扩增条件是模板量为2 μL(50 mg/L),Taq聚合酶(5 u/μL)的量为0.8 μL,退火温度为56 ℃,循环次数为35次.
作 者: 马云 李芬 王启钊 裴灵芝 王伍 MA Yun LI Fen WANG Qi-zhao PEI Ling-zhi WANG Wu 作者单位: 马云,李芬,王启钊,王伍,MA Yun,LI Fen,WANG Qi-zhao,WANG Wu(信阳师范学院,生命科学学院,河南,信阳,464000)裴灵芝,PEI Ling-zhi(苏州大学,生命科学学院,江苏,苏州,215006)
刊 名: 新乡学院学报(自然科学报) 英文刊名: JOURNAL OF XINXIANG UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2009 26(2) 分类号: Q781 关键词: DNA提取 ANGPTL4基因 条件优化 PCR DNA extraction ANGPTL4 gene condition optimize PCR