人hole基因的克隆和序列分析
目的 克隆人的hole基因,并进行生物信息学分析.方法 以胚胎心脏cDNA文库为模板,进行PCR扩增得到hole基因的ORF.并进行亚克隆入PMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,用Xho1进行酶切和测序鉴定阳性克隆.利用Internet和GeneBank数据库对测序结果正确的hole基因进行生物信息学分析. 结果克隆了hole基因,测序结果正确;生物信息学分析表明, hole基因开放读码为960 bp,编码319个氨基酸;同源性分析表明,人的hole与鼠、鸡hole蛋白具有高度同源性.多种组织的半定量RT-PCR研究表明,该基因在心脏、肝脏、肺、脑、肾脏、脾脏、胰脏均有表达,其心脏表达最高. 结论成功克隆hole基因,对其功能进行了初步预测,为进一步的功能研究打下基础.
作 者： 姚峰 周军媚 王佐 陈春芳 吴端生 刘鑫 余坚 作者单位： 姚峰(南华大学,实验动物学部,湖南,衡阳,421001;南华大学,心血管病研究所)周军媚(南华大学,生命科学与技术学院)
王佐(南华大学,心血管病研究所)
陈春芳,吴端生,刘鑫,余坚(南华大学,实验动物学部,湖南,衡阳,421001)
刊 名： 南华大学学报（医学版） 英文刊名： JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION) 年，卷(期)： 2009 37(3) 分类号： Q785 关键词： hole基因 PCR 克隆 序列分析