黑腹果蝇抗真菌肽基因Drs和Drs-lC的原核可溶性表达及抗真菌活性测定
Drosomycin(Drs)是第1个从黑腹果蝇Drosophila melanogaster体内鉴定发现的昆虫抗真菌肽因子.它对细菌无明显的抗性,但对丝状真菌具有高效广谱的抑杀作用.此外,在黑腹果蝇基因组还存在着Drs的另外6个同系物的基因序列,其中同系物Drosomycin-lC(Drs-lC)的抗真菌谱仅次于Drs.将Drs抗真菌肽基因(Drs)和同系物Drs-lC基因(Drs-lC)进行可溶性表达,对果蔬等农产品防腐保鲜的研究有应用前景.本实验将Drs和Drs-lC分别克隆到硫氧还蛋白(Trx)融合表达载体pThiohis A中,转化宿主菌TOP10,进行可溶性表达,并从诱导表达的菌液起始浓度、IPTG的诱导浓度及诱导时间等方面进行了表达条件的优化.结果表明2种融合蛋白Trx-Drs和Trx-Drs-lC大部分以可溶形式表达,可溶性表达的Trx-Drs在上清液中约占菌体总蛋白的22%.2种融合蛋白的表达产物经Ni-NTA亲和层析得到纯化.生测结果表明,2种融合蛋白分别对8种供试真菌中的5种真菌显示明显的抗性.
作 者： 段云 邓小娟 叶明强 杨婉莹 黄亚东 温硕洋 曹阳 DUAN Yun DENG Xiao-Juan YE Ming-Qiang YANG Wan-Ying HUANG Ya-Dong WEN Shuo-Yang CAO Yang 作者单位： 段云,邓小娟,叶明强,杨婉莹,曹阳,DUAN Yun,DENG Xiao-Juan,YE Ming-Qiang,YANG Wan-Ying,CAO Yang(华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系,广州,510642)黄亚东,HUANG Ya-Dong(暨南大学医药生物技术研究开发中心,广州,510632)
温硕洋,WEN Shuo-Yang(华南农业大学资源与环境学院昆虫学系,广州,510642)
刊 名： 昆虫学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ENTOMOLOGICA SINICA 年，卷(期)： 2006 49(5) 分类号： Q966 关键词： 黑腹果蝇 抗真菌肽 原核表达 可溶性表达 抗真菌活性