p65结合肽与p65的亲和力检测及其对NF-κB DNA结合活性抑制作用的鉴定
目的检测NF-κB p65亚基结合肽与p65间相互作用的亲和常数,以及其对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.方法借助于生物传感器技术分析NF-κBp65亚基结合肽与p65相互作用的动力学,同时应用竞争性ELISA鉴定结合多肽对NF-κB DNA结合活性的抑制效应.结果生物传感器技术分析结果表明5条p65结合肽均能与p65发生相互作用,相互作用的亲和常数分别为GST-BPT1:2.67×10-7mol/L、GST-BPT2:9.02×10-6mol/L、GST-BPT3:1.07×10-6mol/L、GST-BPT4:8.03×10-6mol/L、GST-BPT5:9.83×10-7mol/L.竞争性ELISA检测结果表明5条p65结合肽均能在一定程度上抑制NF-κB与其顺式作用元件κB基序的结合,且这种抑制效应随多肽浓度的增加而增强.结论酵母双杂交筛选获得的5条p65结合多肽与p65间确实存在相互作用,且5条结合肽对NF-κBDNA结合活性均有一定的抑制效应,由此提示以这些多肽为先导物设计和开发靶向NF-κB的抗炎多肽药物将成为可能.
作 者： 徐祥 梁华平 郑江 吴强 刘东擘 史海水 胡湘南 王正国 朱佩芳 XU Xiang LIANG Hua-ping ZHENG Jiang WU Qiang LIU Dong-bo SHI Hai-shui HU Xiang-nan WANG Zheng-guo ZHU Pei-fang 作者单位： 徐祥,梁华平,吴强,刘东擘,史海水,王正国,朱佩芳,XU Xiang,LIANG Hua-ping,WU Qiang,LIU Dong-bo,SHI Hai-shui,WANG Zheng-guo,ZHU Pei-fang(第三军医大学,大坪医院野战外科研究所第一研究室,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆,400042)郑江,ZHENG Jiang(第三军医大学,西南医院中心实验室,重庆,400038)
胡湘南,HU Xiang-nan(重庆医科大学药物化学教研室,重庆,400046)
刊 名： 第三军医大学学报 ISTIC PKU 英文刊名： ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE 年，卷(期)： 2006 28(7) 分类号： Q503 Q51 Q58 关键词： NF-κB p65 生物传感器 多肽