人趋化因子受体CCR6的克隆、表达及其功能分析
目的 构建人趋化因子受体6(CCR6)cDNA序列的真核表达载体,并在HEK293细胞中表达,为研究CCR6生物学功能和筛选CCR6拮抗剂奠定基础.方法 采用RT-PCR方法从人扁桃体克隆CCR6受体的DNA片段,并将该片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;将该质粒pcDNA3.1(+)-CCR6转染HEK293细胞,用流式细胞术检测转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞;采用体外趋化实验、钙流实验,验证转染pcDNA3.1(+)-CCR6质粒的HEK293细胞表面表达的CCR6的生物学活性.结果 经RT-PCR获得了编码人CCR6受体的DNA片段,构建了重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-CCR6;转染HEK293细胞,经流式细胞仪检测、趋化实验、钙流实验证实,表达CCR6的HEK293细胞具有趋化因子受体CCR6的生物学活性.结论 重组人趋化因子受体CCR6克隆成功,并在HEK293细胞中获得了表达,为研究CCR6的生物学功能及筛选CCR6拮抗剂奠定了基础.
作 者： 沈大斌 龚小云 顾涛 罗福康 郑红 作者单位： 第三军医大学西南医院综合实验研究中心,重庆 400038 刊 名： 重庆医学 ISTIC PKU 英文刊名： CHONGQING MEDICINE 年，卷(期)： 2006 35(18) 分类号： Q785 关键词： 人趋化因子受体6 pcDNA3.1(+) 趋化实验 钙流实验 克隆