DEAE-Sepharose-FF离子交换层析对牛背最长肌中钙激活酶的纯

DEAE-Sepharose-FF离子交换层析对牛背最长肌中钙激活酶的纯化研究

通过DEAE-sepharose-FF离子交换层析法,对牛背最长肌中钙激活酶(calpain)进行了分离纯化,并确定了最佳分离条件.试验分2个阶段进行离子交换线性梯度洗脱,第1阶段线性梯度为浓度0～215 mmol/L NaCl,第2阶段线性梯度为浓度215～500 mmol/L NaCl,洗脱流速为2 mL/min,并对每一纯化步骤蛋白浓度的变化情况作出了详细的描述和说明;在波长280 nm下测定洗脱液的光吸收值,洗脱得到3个蛋白峰,μ-calpain和m-calpain分别在NaCl浓度为130～200 mmol/L和230～330 mmol/L时被洗脱下来,钙激活酶蛋白抑制剂(calpastatin)在NaCl浓度为25～125 mmol/L时被洗脱下来.calpain的分子量约为110 kDa,通过对提取液电泳试验表明,检测结果恰好在分子量约为110 kDa处有一条清晰的带,说明所得提取物为calpain.

作 者： 胡鹏 罗欣 杜方岭 Hu Peng Luo Xin Du Fangling   作者单位： 胡鹏,杜方岭,Hu Peng,Du Fangling(山东省农业科学院原子能研究所,山东,济南,250100)

罗欣,Luo Xin(山东农业大学食品学院,山东,泰安,271018) 

刊 名： 农产品加工·创新版  英文刊名： AEM RODUCTS ROCESSING  年，卷(期)： 2009 ""(10)  分类号： Q954.66  关键词： 钙激活酶   离子交换色谱   分离纯化