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Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞体外模拟缺血性损伤保护作用的实验研究

时间：2021-12-12 19:40:39 生物医学论文我要投稿

Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞体外模拟缺血性损伤保护作用的实验研究

目的观察Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外模拟缺血性损伤的保护作用,从而为下一步Bcl-2基因修饰的MSCs移植治疗脑缺血的实验研究奠定基础.方法采用密度梯度离心结合贴壁法分离、培养大鼠MSCs,对培养第5代的MSCs进行鉴定;用脂质体转染法对MSCs行人Bel-2(hBcb2)基因转染,转染后用G418进行筛选,然后用免疫荧光细胞化学技术检测其蛋白的表达;采用血清剥夺和缺氧(SOD)处理建立MSCs体外模拟缺血性损伤模型,通过流式细胞术和TUNEL原位细胞凋亡检测评价转染hBcl-2基因的MSCs和未转染的MSCs的凋亡及存活情况.结果密度梯度离心结合贴壁法能有效分离、纯化大鼠MSCs,免疫组化检测显示培养的细胞CD44、CD71表达阳性,而CD45表达阴性;转染hBcl-2基因的MSCs经G418筛选后有hBd-2蛋白的稳定、高效的表达;流式细胞术检测显示和MSCs相比,转染hBcb2基因的MSCs在SOD后及9h凋亡细胞较少,存活细胞较多.TUNEL原位细胞凋亡检测也显示转染hBcl-2基因的MSCs的凋亡明显减少(P<0.05).结论转染hBcl-2基因的MSCs有其蛋白的稳定表达,hBcl-2基因转染可对抗MSCs体外模拟缺血性损伤引起的细胞凋亡,从而具有保护性作用.

Bcl-2基因转染对骨髓间充质干细胞体外模拟缺血性损伤保护作用的实验研究

作者：张小乔梅元武张红郑丽芳郭远瑾徐江华作者单位：张小乔(郧阳医学院附属十堰市太和医院神经内科)

梅元武,张红,郑丽芳,郭远瑾,徐江华(华中科技大学同济医学院附属协和医院神经内科,武汉,430022)

刊名：卒中与神经疾病 ISTIC 英文刊名： STROKE AND NERVOUS DISEASES 年，卷(期)： 2008 15(3) 分类号： Q813 R743 关键词： Bcl-2 基因转染骨髓间充质干细胞缺血性损伤保护作用

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