溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化

溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化

为进一步研究溶藻弧菌碱性丝氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物学活性和功能,将构建的pET23d-asp在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行纯化分析,并优化表达条件.结果表明:在咪唑洗脱缓冲液浓度为100 mmol/L时,表达的可溶性ASP被大量洗脱,纯化的ASP相对分子质量约为42 000,具有蛋白活性;在诱导温度28℃、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度1 mmol/L及诱导时间16 h时,表达的活性ASP蛋白最多.

作 者： 蔡双虎 鲁义善 吴灶和 简纪常 汤菊芬 黄郁葱 CAI Shuang-hu LU Yi-shan WU Zao-he JIAN Ji-chang TANG Ju-fen HUANG Yu-cong   作者单位： 广东海洋大学水产学院,广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省水产经济动物病害控制重点实验室,广东,湛江,24025  刊 名： 广东海洋大学学报  ISTIC 英文刊名： JOURNAL OF GUANGDONG OCEAN UNIVERSITY  年，卷(期)： 2008 28(3)  分类号： Q933+S917.1  关键词： 溶藻弧菌   asp基因   基因构建   基因表达   表达条件   大肠杆菌  

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