甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

甲醇利用菌SDM11中glyA基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要： 对甲醇降解菌Methylobacterium.sp SDM11中的glyA基因进行克隆及特性研究,以获得更多的丝氨酸羟甲基转移酶(serine hydroxymethyltransferase,SHMT)资源.根据GenBank中已报道的Methylobacterium extorquens AM1 中的glyA基因序列(登录号:L33463)设计引物,以SDM11的.基因组DNA为模板,PCR扩增glyA基因.利用pETblue-2载体将该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中得到表达.PCR扩增到一个1.40 kb大小的DNA片段,经过blast软件比对分析,发现该片段与已报道的Methylobacterium extorquens AM1的glyA基因的序列相似性为95%,氨基酸序列的相似性为98%.该基因编码468个氨基酸,预测的分子量大小为52.2 kD,等电点为7.02,发现纯化后的目标蛋白具有SHMT酶活性,并初步测定了酶活力. 作 者： 孔庆胜    张向阳    韩晓琳    林强    董全林   作者单位： 孔庆胜,张向阳,韩晓琳(济宁医学院,日照,276826)

林强,董全林(华中科技大学,武汉,430071) 

期 刊： 生物技术通报  PKU   Journal： BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年，卷(期)： 2010, ""(5)  分类号：   关键词： SDM11    glyA基因    克隆    表达    SHMT酶   

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