活性污泥高质量总RNA提取的一种有效方法
摘要: 提取高质量的RNA是在基因表达水平上研究废水生物处理过程活性污泥中微生物菌群变化及关键调控基因表达规律的.必要条件,但由于活性污泥富含腐殖质与RNA酶,导致常规提取方法难以获得高质量的RNA.本研究通过反复探索与试验,得到了一种经济而快捷的从活性污泥中提取高质量RNA的方法,即在PBS洗涤沉淀污泥的基础上,用含PVP和巯基乙醇的CTAB(十六烷基溴化三甲胺)裂解液裂解活性污泥细胞,并与细胞中的核酸形成核酸-CTAB复合体,然后用酚-氯仿-异戊醇去除细胞裂解液中的蛋白,最后采用LiCl选择性沉淀其中的RNA.经核酸蛋白测定仪和1 %变性琼脂糖凝胶电泳检测表明,用此方法提取的RNA均一性和完整性好,并且具有反转录活性. 作 者: 黎秋华 李平 陈忠正 吴锦华 梁世中 LI Qiu-hua LI Ping CHEN Zhong-zheng WU Jin-hua LIANG Shi-zhong 作者单位: 黎秋华,梁世中,LI Qiu-hua,LIANG Shi-zhong(华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510006)李平,吴锦华,LI Ping,WU Jin-hua(华南理工大学环境科学与工程学院,广东,广州,510006)
陈忠正,CHEN Zhong-zheng(华南农业大学食品学院,广东,广州,510640)
期 刊: 陕西科技大学学报(自然科学版) ISTIC Journal: JOURNAL OF SHAANXI UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION) 年,卷(期): 2008, 26(4) 分类号: X172 关键词: 活性污泥 RNA提取 CTAB【活性污泥高质量总RNA提取的一种有效方法】相关文章:
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