牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定
通过IPTG诱导的大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定.获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000.
作 者： 李超 林祥梅 余多慰 李全芬 李桂芬 韩雪清 作者单位： 李超,余多慰,李全芬(南京师范大学生命科学学院,江苏南京,210046)林祥梅,李桂芬,韩雪清(中国检验检疫科学研究院,北京,100029)
刊 名： 动物医学进展 PKU 英文刊名： PROGRESS IN VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)： 2010 31(4) 分类号： S852.43 关键词： 牛γ干扰素 单克隆抗体 鉴定