家蚕丝素轻链蛋白多克隆抗体的制备及应用
本研究通过用回收纯化的Fib-L蛋白为抗原免疫家兔,获得多克隆抗体,通过与家蚕大造5龄5d的10个不同组织进行Western blot,结果表明,制备的Fib-L抗体能识别在后部丝腺特异合成的Fib-L蛋白,表明该抗体有较好的特异性.利用此抗体进行丝腺组织的免疫组化,经抗体的一系列的梯度稀释和条件探索,发现当Fib-L一抗在1∶50和荧光二抗1∶1000的条件下得到理想的免疫组化结果,在荧光显微镜下观察到了二抗标记的绿色荧光.以上结果显示,本实验成功制得Fib-L 蛋白抗体,获得丝腺组织免疫组化的一些重要参考信息,为家蚕丝腺功能基因的研究及细胞定位提供了一定的参考价值.
作 者: 刘春 韩宇 荣海博 侯勇 陈玉琳 高志宏 夏庆友 LIU Chun HAN Yu RONG Hai-bo HOU Yong CHENG Yu-lin GAO Zhi-hong XIA Qing-you 作者单位: 西南大学蚕学与系统生物学研究所,重庆,400716 刊 名: 蚕学通讯 英文刊名: NEWSLETTER OF SERICULTURAL SCIENCE 年,卷(期): 2009 29(1) 分类号: S8 关键词: 丝素基因 Fib-L蛋白 多克隆抗体 Western blot 免疫组化