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非洲山毛豆叶片蛋白组双向电泳样品制备方法的建立

时间:2021-12-13 09:44:20 工业农业论文 我要投稿

非洲山毛豆叶片蛋白组双向电泳样品制备方法的建立

以非洲山毛豆叶片为材料,对非洲山毛豆总蛋白质3种提取方法(TCA/丙酮沉淀法、尿素/硫脲法和酚-甲醇/醋酸铵沉淀法)以及3种蛋白裂解液进行比较分析.结果表明,采用酚-甲醇/醋酸铵沉淀法提取非洲山毛豆叶片总蛋白,用蛋白裂解液(7 mol/L尿素,2 mol/L硫脲,4% CHAPS,40 mmol/L Tris-base,1% Bio-Lyte pH3.5-10,65 mmol/L DTT)裂解蛋白1 h,2-DE图谱分离到的蛋白点效果最好.此方法适合于色素、多酚及黄酮类次生代谢物含量较多的非洲山毛豆叶片总蛋白制备方法.

作 者: 赖多 徐汉虹   作者单位: 华南农业大学,天然农药与化学生物学教育部重点实验室,广州,510642  刊 名: 生物技术通报  PKU 英文刊名: BIOTECHNOLOGY BULLETIN  年,卷(期): 2010 ""(4)  分类号:   关键词: 非洲山毛豆   叶片   蛋白质组   双向电泳   Tephrosia vogelii   Hook f.   Leaf   Proteome   Two-dimensional electrophoresis