禽多杀性巴氏杆菌ompa基因在Vero细胞中的表达
利用PCR技术扩增出禽多杀性巴氏杆菌1 050 bp的ompa基因片段,克隆到pUCm-T载体上,再亚克隆到真核载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pCA(pcDNA3.1-OmpA),将该重组质粒体外转染Vero细胞,检测其转录和表达情况.结果表明重组质粒pCA构建成功,通过RT-PCR由转染了重组质粒的Vero细胞中扩增出了目的条带,间接免疫荧光试验分析表明在转染了pCA的Vero细胞中出现绿色荧光,Western blotting分析显示重组质粒pCA转染的Vero细胞泳道出现约37.5ku的特异条带,说明ompa基因在Vero细胞中成功表达了活性蛋白,从而为进一步研究禽多杀性巴氏杆菌ompa DNA疫苗的免疫效果奠定了基础.
作 者： 宫强 牛明福 秦翠丽 张敏 孙晓菲 王帅涛 程铭 作者单位： 河南科技大学,河南洛阳,471003 刊 名： 中国家禽 PKU 英文刊名： CHINA POULTRY 年，卷(期)： 2010 32(8) 分类号： 关键词： 禽多杀性巴氏杆菌 ompa基因 RT-PCR 间接免疫荧光试验