H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法的建立
目的:建立H1N1猪流感病毒环介导等温扩增(LAMP)快速检测方法.方法:从GenBank中获得H1N1猪流感病毒血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)基因序列,应用DNAStar软件MegAlign程序分析其序列,利用Primer Explorer V4软件在序列保守区域设计LAMP引物,即外引物和内引物,同时以H1N1猪流感病毒的cDNA作为阳性模板,对试验中的几个反应条件进行优化.结果:LAMP检测方法对H1N1猪流感病毒的灵敏度达到4～6个拷贝,其引物对于H9亚型禽流感病毒、猪瘟病毒和猪圆环病毒均无非特异性扩增,表现出良好的特异性.结论:建立的H1N1猪流感病毒环介导等温扩增快速检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,为快速检测猪流感病毒提供了新方法和新思路.
杨兵,周宏专,曾作财,陈小玲(北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097)
孙继国(河北农业大学动物科技学院,河北保定,071000)
赵景义,马志军(北京市畜牧兽医总站,北京,100029)
刊 名： 中国动物检疫 PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF ANIMAL HEALTH INSPECTION 年，卷(期)： 2010 ""(5) 分类号： S852.659.5 关键词： H1N1猪流感病毒 环介导等温扩增 条件优化