NO介导的小鼠胸腺细胞中线粒体的变化在细胞凋亡过程中的作用
目的:研究一氧化氮(NO)介导的胸腺细胞凋亡中线粒体膜电位(△ψm)和心磷脂(CL)含量变化的特点.方法:以S-亚硝基-N-乙酰青霉胺(SNAP)作为NO的供体诱导胸腺细胞凋亡,以地塞米松(DEX)作为阳性对照药物;设空白对照组、SNAP组和DEX组3个实验组;经膜联蛋白Ⅴ(annexinⅤ mAb)和碘化丙啶(PI)染色后,用流式细胞术(FCM)检测细胞磷脂酰丝氨酸(PS)外翻;用3,3'-二已基噁羰花青碘化物[DiOC6(3)]和PE-anti-annexin Ⅴ mAb检测凋亡中△ψm变化;用壬基吖啶橙(NAO)和PE-anti-annexin Ⅴ mAb检测凋亡中线粒体CL变化.结果:SNAP作用后6 h,胸腺细胞出现典型的细胞凋亡特征,多数annexin Ⅴ阳性的细胞出现皱缩.DEX组△ψm降低且未凋亡的细胞比例显著高于空白对照组(P＜0.01);而SNAP组该群细胞所占比例与空白对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).各组中约40%～50%的DiOC6(3)阴性细胞同正常细胞的大小.SNAP组CL含量降低的凋亡细胞所占比例显著高于对照组(P＜0.01),未见CL含量降低且未凋亡的细胞群.空白对照组和SNAP组中分别有(48.32±3.96)%、(43.64±4.90)%的细胞CL含量降低但大小同正常细胞.结论:NO介导的小鼠胸腺细胞的凋亡过程,依次为磷脂酰丝氨酸外翻、线粒体去极化、CL氧化及细胞皱缩.同DEX模型组相比较,NO介导的小鼠胸腺细胞线粒体的变化为凋亡过程中较晚期的变化.
作 者： 王通 曾耀英 邢飞跃 贺芳 王炯坤 WANG Tong ZENG Yao-ying XING Fei-yue HE Fang WANG Jiong-kun 作者单位： 暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室,广东,广州,510630 刊 名： 细胞与分子免疫学杂志 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF CELLULAR AND MOLECULAR IMMUNOLOGY 年，卷(期)： 2006 22(3) 分类号： Q255 关键词： 一氧化氮 S-亚硝基-N-乙酰青霉胺 线粒体 凋亡