基因枪法导入cyclAt和GUS基因获得转基因水稻
以cyclAt基因为目的基因,HPT和GUS为选择和报告基因,应用PDS-1 000/He型基因枪协同转导,通过轰击来源于水稻成熟种子诱导产生的胚性愈伤组织,获得了转基因水稻植株.结果表明:通过X-Gluc染色分析,GUS基因在愈伤组织和再生植株叶片中的表达效率高.以转基因植株的基因组DNA为模板,用cyclAt基因的特异性引物对其进行PCR扩增,只检测到1 000bp左右的片段,比其1 604bp的完整序列小,因此推测cyclAt基因在转导入水稻后被剪接.此外,在协同转导过程中,cyclAt和GUS可能与受体基因组DNA随机整合,因此视GUS基因为报告基因有一定局限性;但两者同时被整合的频率远高于单一基因的整合.
作 者： 旷仁平 姜孝成 张春来 Malcom C Elliott 徐孟亮 肖国樱 KUANG Ren-ping JIANG Xiao-cheng ZHANG Chun-lai Malcom C Elliott XU Meng-liang XIAO Guo-ying 作者单位： 旷仁平,姜孝成,徐孟亮,KUANG Ren-ping,JIANG Xiao-cheng,XU Meng-liang(湖南师范大学生命科学学院,中国,长沙,410081)张春来,Malcom C Elliott,ZHANG Chun-lai,Malcom C Elliott(英国德蒙特福大学健康与生命科学学院诺曼-布拉格研究所,英国莱斯特)
肖国樱,XIAO Guo-ying(中国科学院亚热带农业生态研究所,中国,长沙,410125)
刊 名： 湖南师范大学(自然科学学报) ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF NATURAL SCIENCE OF HUNAN NORMAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 29(3) 分类号： Q3 关键词： 水稻 基因枪转化 cyclAt GUS PCR