针刺小皱蝽成虫腹部,诱导免疫防御反应,小皱蝽成虫组织经过浸提、浸提液TFA酸化、超速离心、超滤、固相萃取等分离步骤,平板生长抑制试验检测抗菌活性.在C18 Sep-Pak固相萃取柱上,40%ACN洗脱组分为初样品,经RP-HPLC、GPC-HPLC及填料孔径更小的反相色谱柱纯化,得到0.452 mg AMP-2样品.琼脂孔扩散法检测AMP-2抗菌活性,回收率为4.04%.抗菌肽AMP-2在Superdex Peptide凝胶过滤柱上测得分子量(Mr)为3.2×103,茚三酮反应紫色.AMP-2具有一定热稳定性,在pH 3～8的乙酸铵缓冲液中抗菌活性强,对检测的动植物病原菌具有广谱抗菌活性,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌D22、枯草芽孢杆菌的MIC值为2.5μg/mL,对四联球菌的MIC值为5.0μg/mL,AMP-2可能为富含脯氨酸的小分子抗菌肽.图3表2参11
作 者： 杨泽宏 杨星勇 罗克明 董玉梅 YANG Zehong YANG Xingyong LUO Keming DONG Yumei 作者单位： 杨泽宏,YANG Zehong(四川大学华西基础医学与法医学院生物分子实验室,成都,610041)杨星勇,罗克明,董玉梅,YANG Xingyong,LUO Keming,DONG Yumei(西南大学生物技术中心,重庆,400716)
刊 名： 应用与环境生物学报 ISTIC PKU 英文刊名： CHINESE JOURNAL OF APPLIED & ENVIRONMENTAL BIOLOGY 年，卷(期)： 2006 12(2) 分类号： Q516 关键词： 小皱蝽 抗菌肽 诱导 分离纯化